用共聚焦观察免疫组化结果比一般光镜好狠多吗

如果你牵涉到不同的二抗，或者不同的荧光染色，并且你那也有条件使用激光共聚焦，我建议是使用共聚焦较好，原因在于激光共聚焦它本身的特点。如下：

激光共聚焦显微镜是采用激光作为光源，在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置，并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。主要系统包括激光光源、自动显微镜、扫描模块（包括共聚焦光路通道和针孔、扫描镜、检测器）、数字信号处理器、计算机以及图象输出设备（显示器、彩

色打印机）等。通过激光扫描共聚焦显微镜，可以对观察样品进行断层扫描和成像。因此，可以无损伤的观察和分析细胞的三维空间结构。同时，通过激光扫描共聚焦显微镜也是活细胞的动态观察、多重免疫荧光标记和离子荧光标记观察的有力工具.精确地对光谱的本质进行分析，区分发射光谱高度重叠的不同标记的信号。

最重要的是，对于多色的荧光染色，它能彻底消除了荧光串色的影响，同时最大限度的减少了样品荧光信号的损失。这些都是一般光镜所不能达到的。

除此之外，你也可以同时用这两种仪器进行检测，比较结果，看那种更能说明你想解决的问题。祝你好运！

求助HE染色和免疫组化

病理工作计划篇1

又是一年春来到，过去的一年我们病理科较圆满的完成了年度的工作目标，在新的一年为xx年度工作做出以下计划安排。

1.科室成员一如既往严格遵守各项法律法规，严格遵守医院及国家颁布的各项规章制度，遵守劳动纪律，杜绝违法违纪事件发生;恪守职业道德，端正思想，以热忱的服务对待患者，团结协作，消灭事故纠纷的发生，提升医务工作者在患者心目中的形象。积极完成上级及院部布置的各项工作及任务。

2.我科业务量逐年稳定显著增长，我们继续努力保持这种良好的发展形势。力争在年内常规外活检、快速诊断、细胞学、及特染免疫等工作量(包括例次及张件)在xx年基础上增长10%。业务收入在去年80余万，收支节余40余万的水平上，努力做到有15%以上的增加。为顺利落实上述目标，加强对内对外学习联络，继续并逐步扩展常用的免疫组化项目的应用，推广液基细胞学诊断这项较新的技术。同时要重视开源节流，对试剂耗材领用做到每月有计划，用量有登记：仪器设备定期维护并做好登记，杜绝浪费，减少开支。注意节水节电，从小事入手。

3.争取本年度省病理质控考核优秀。每月均组织科室内业务学习一次，数次疑难病理讨论并做好登记记录。落实诊断二级复片制的实施。每季度每月均组织抽检病例并登记在册，进行室内质控，完善各项登记记录台帐。科室人员每人尽可能安排参加相应职称所需继续教育学习，督促参加院内组织的业务学习。争取年内完成并论文发表1篇。积极参加各级质控中心组织安排的学习班及读片会，鼓励大家钻研业务，加强交流，互帮互学，在融洽的气氛中开展工作。做好带教工作。

4.为合理人员配置，适应工作需要，今年申请分配我们诊断医师一名，满足科室业务的快速增长。(医技比例达到3：3)。

5.严格遵守科室内的各项工作制度，以严谨、细致的态度对待工作的每一环节，及时发现及纠正出现的问题隐患，加强业务学习，安全医疗时刻记在心中。以质控要求为准绳，在本年内全科室力争消除事故纠纷的发生，减少各类差错发生，争取实现患者零投诉。同时把上述事件发生情况与科室奖金二次分配相结合。

6.加强同临床科室的沟通，提高服务意识，满足患者及临床医师不断提高的要求，报告及时并准确率高(具体依据质控要求)。协助临床科室开展科研工作。继续立足于本院，服务于嘉善各家医院(冰冻切片送检及疑难片会诊)，做好我们的工作。

7.积极参加医院组织的各项文体及公益活动，关心医院发展。讲究卫生，维护科室及环境整洁有序。

今年我们工作仍紧紧围绕医疗质量为工作中心，安全医疗为工作重点，在工作中我们也不断完善改进工作计划，做好新一年的工作。

病理工作计划篇2

一、 病理科紧跟医院20xx“精品建设年”的.战略部署，年内科室将按照三级医院评审标准，重点加强内涵建设，努力配合医院实现“精品建设年”。

二、 按照科室三级医院评审的标准，认真梳理每一项工作要求，按照轻

重缓急排好顺序，通过对日常工作的进一步规范，从每一点滴抓起，严格执行标准、规定，避免以往评审前各种记录、指标现补现造，真正让三甲标准成为我们的日常工作标准。

三、 继续利用现有设备，开展术中快速冰冻及快速石蜡病理诊断。加强三基训练，力争在出片时间、质量及诊断准确率方面有进一步提高。保证常规病理诊断正确率》98%，冰冻切片诊断正确率》95%，切片优良率》85%。

四、 联合妇产科、查体中心，开展好妇科tct检测进行宫颈癌普查。

五、 力争开展细胞块检查项目。针对我院肿瘤晚期病例较多的情况，利用胸、腹水离心制成细胞块，既可以通过免疫组化提高诊断及鉴别诊断率，也可为临床开展肿瘤靶向治疗提供依据。

六、 联合临床科室合作科研项目。我们的科研如果有病理证实将大大提高其可信度及档次。我们的诊断及科研水平也将大提升。

展望未来，有院领导的高瞻远瞩、鼎力支持，我们一定努力工作，精益求精，为实现医疗的优质服务和医疗安全做出贡献，使病理科的内涵建设真正达到三甲医院标准。

病理工作计划篇3

一、病理科发展存在的困难：

1.病理科人手紧缺：

诊断医师6名(助理1人），外出进修1名；技术员4名，随着近些年病例量的逐步增多，人员近两年来基本是超负荷运转，加班加点已经成为正常现象，才能基本保证目前的常规病理按时完成，一旦申请新的项目成功，以目前的人员配备，无法为新项目的运转提供必要的人力储备。

2.病理科办公条件差，设备老化明显

目前病理科的面积，配备均与三甲标准存在差距，办公条件也相对艰苦，譬如空调老旧失修等问题。

作为一家三甲医院的病理科，我们到目前为止在制片方面，尤其是包埋和染色环节，基本上都是靠人力手动完成，这本身已经大大落后于省内同级医院病理科，加上人力制片存在着耗时费力以及制片规范化欠缺的问题，对我们后期的诊断也有着不同程度的影响。

3.新项目开展计划滞后

目前我们作为一家三甲医院，仅有常规h-e切片，免疫组化，部分特殊染色以及细胞学，而作为三甲医院必备的一些项目，如分子病理学一直未能开展，新项目的无法开展，大大制约着病理科的前进和发展，只靠着h-e诊断，不仅存在着局限性，而且在指导临床用药、治疗方案和预后判断方面都显得无能为力，这就削弱了病理和临床之间的联系。

4.奖金分配比例

到目前为止，病理科的奖金并不高，如果按照原先的奖金比例，一旦新项目开展起来，实验耗材、人员的增加等因素会对奖金产生很大的影响。

二、未来发展方向：

作为一家致力于发展和创新的三级甲等医院病理科，我们的发展计划是，

1.在未来的几年内，引进高水平的技术性人才力量，为病理科的发展提供人力资源储备；

2..更换科室的老旧设备，为病理科的发展提供技术性保障；

3.致力开展三新项目，为病理科的发展提供科技型保障；

4.同时加上个人专业水平的钻研，多发表一些有质量的科研型文章，为病理科的发展提供知识储备！

5.全倾全力，使本科室成为巢湖地区的病理诊断中心！

在此，我们希望院领导可以考虑，

1.酌情提高奖金分配比例，有利于我们放手引进人才；

2.仪器耗材方面的调整和优惠，有利于我们开展新的项目；

3.增加外出参加病理会议的额度，有利于我们的理论知识的学习和沟通。

4.部分办公设施的更换。

病理工作计划篇4

20xx年在医院各位领导及各临床科室，尤其是手术科室支持下，圆满完成了各项工作任务，未出现一例差错事故，完成外检石蜡病例 2982 例，脱落细胞学检查6109例。

20xx年在院领导支持下开展了术中冰冻这项新技术项目，在20xx年术中冰冻得到手术科室尤其是肿瘤外科的大力支持。全年共做术中冰冻xx5例，其中外4科80例，阳性病例45例；五官科11例，阳性病例2例；外1科17例，阳性病例6例；妇科27例，阳性病例4例。为临床手术提供了有利参考，减少了病人二次手术的痛苦。李红民老师来我院主持冰冻，工作之余把她毕生所学的知识毫不保留的传授给我们，科内的疑难病例问题也由于李老师的到来迎刃而解，李老师像一本教科书，给我们详细讲解病例的入手之处，使大家受益匪浅，有力提高了我科病理诊断技术水平。

宫颈液基细胞学检查在过去的一年里继续得到了妇科大夫的大力支持，液基细胞界面清晰，对宫颈异常细胞检查具有高度的敏感性，容易发现各种异常细胞，早期发现有问题的细胞，使病人能得到早期治疗，病人受到的创伤最小。全年共查出阳性病例 101 例，病人得到早期发现早期治疗，有效减少宫颈癌的发生。

胸水液基细胞学在今年开展。胸水查找癌细胞是辅助临床诊断晚期肿瘤的重要手段，以前胸水制作是手工制作，涂片质量得不到有效保证，用液基细胞制片术后，细胞均匀、背景清晰，提高了诊断准确性，而且收入也相应增加，经济效益双丰收。

病理科目前有六名员工，在戚主任带领下都认真工作，严格要求自己，遵守医院各项规章制度，加强政治学习，工作同时也在不断学习，每一天都力求有进步。医院领导由于工作需要为病理科调整了工作人员，病理科增加了两名新生力量，为今后病理科发展创造了可能。在今后工作中科内会尽量代教新人，教他们从最基本的做起，扎实走稳每一步，并把工作经验、 心得体会 传给他们，让他们快速成长，成为病理科有力的后继力量。

科内全体员工对科内现有图文分析系统、切片机、显微镜等设备认真养护，开源节流，对于我科的日常工作必不可少的耗材，从各种试剂到酒精，甚至每一张纸都做到物尽其用。

20xx年是我院搬迁到新医院关键性的一年，鉴于病理科设备简陋，到医院新址后，希望医院能给病理科购置脱水机、包埋机等设备并且，能改善保护员工措施，大家都知道甲醛、二甲苯都是对人体危害很大的化学制剂，我科员工从外检取材一直到切片封片都脱离不了这些试剂，希望新医院建成之际能给装上通风柜等设施，以保护员工身体健康。

20xx年病理科全体员工将继续努力工作，争取把工作做到最好，继续提高诊断水平，保证切片质量，为临床提供支持。如果条件允许可与天津金域合作开展免疫组化，提高诊断准确率同时减轻病人负担。我本人年纪轻、资历浅，今后在戚主任带领下要加倍努力工作，学习知识，有事多向领导及资深员工请教，尽量把问题解决圆满。还希望院领导能重视病理科，体会病理科工作的特殊性，从多方面为病理科考虑、打算。希望临床科室给予关怀和支持，提出宝贵意见，我将以最大的热情投入工作之中。

病理工作计划篇5

结合上级卫生行政部门及我院院内感染控制工作要求，为提高我科院内感染管理质量为目标，我科根据《医院感染管理规范》、《消毒技术规范》和《传染病防治法》等有关文件与规定，制定相应的院内感染控制计划如下：

一、完善管理体系，发挥体系作用

1. 为进一步加强医院感染管理工作，明确职责，落实任务，重新调整充实临床科室感染监控小组，完善三级网络管理体系。

一门诊院内感染控制小组

组长

副组长：

医生院内感染控制成员：

护士院内感染控制成员：

2. 将医院感染管理部分加入了我科医疗护理质量督察中，制订相应奖惩办法。

3. 制定月计划、周安排，日重点，在实施的同时做好记录备案。

二、医院感染监测方面

1、病历监测：控制感染率并减少漏报

2、环境监测方面;对门诊环境、空气、衣物、医务人员手、消毒液、无菌物品定期监测。

3、消毒灭菌监测：每日对全科使用中消毒液进行监测;对使用中的紫外线灯管进行监测，并执行照射小时数登记，定期更换，以确保消毒质量。每周对我科使用的消毒剂及一次性医疗器械和物品进行自查。

4、抗生素使用调查

定期对全科抗生素使用情况进行检查，防止滥用抗生素。

三、门诊严格实行分诊制度。

四、严格执行医疗废物分类、收集、运送等制度杜绝泄漏****。

七、多渠道开展培训，提高医务人员院感意识。

八、对发生的院内感染及时完成上报。

九、采取多种形式的感染知识的培训 ：将集中培训与晨会科室培训有机结合，增加医务人员的医院感染知识，提高院感意识。

十、将手卫生与职业暴露防护纳入我科院内感染控制工作中的重点，加强手卫生及职业暴露防护。

病理工作计划篇6

转眼间又要进入新的一年?2017，新的一年是一个充满挑战、机遇与压力开始的一年，现就2017年提前制定工作计划如下：

一、抓好院容院貌和两个文明建设

强化院内外环境卫生的整洁，完善各项卫生工作制度和保洁措施，调动广大员工的积极性和主动性，努力提高服务质量，做到经常与突击相结合，实行岗位责任制，坚持进行卫生工作检查评比制度。继续努力把全院的卫生各项工作全面推向社会服务代管理，使我院的环境卫生工作落到实处，营造一个干净、整洁、、环境舒适、绿化优美的就医环境。

二、工作目标

(一)坚决杜绝重特大刑事案件的发生，不发生重特大医疗事故、消防、交通等安全事故，杜绝集体上访事件。

(二)在安全管理方面，切实落实风险防范措施，设专人负责，发现隐患及时处理。

(三)加强院内的安全学习、培训管理，每季度对全院职工开展一次法律安全教育，不断增强职工的法律安全意识。

(四)为了加强院内的安全防范工作，严格落实值班制度，节假日有领导带班，无脱岗、漏岗现象，认真做好值班记录。

(五)加强对我院临时用工人员的管理，对临时用工人员做到情况明，底数明，管理规范。

三、积极整改

(一)针对上一年度安全工作中暴露出的问题，进一步修订和完善各种 规章制度 ，全面落实安全生产责任制，明确划分岗位职责、标准明了、程序清楚，同时细化各岗位、各部门的考核细则，严格考核，真正做到依法治院、科学管理。

(二)总务人员相对不足，希望领导重视，增加人员。

病理科季度工作计划

第一季度：1、 加强后勤人员的政治理论学习，努力提高业务能力和工作水平，学习先进的技术技能，丰富业务知识。

2、 加强安全防范意识，执行公物巡查制度。

3、总结2015年医疗消耗和节能管理中存在的问题，进一步完善采购制度与节能降耗管理。树立为临床一线服务,当好后勤兵的观念。

第二季度：1、根据医院发展需要，采购设备

2、天气渐进干燥，安全检查小组应加强安全巡逻，排查安全隐患，防火防灾，做好医院消防设施，完整记录日常安全管理工作台帐。

第三季度：1、加强医院后勤仓库的管理工作，严格遵守各项规章制度，树立为临床一线医疗服务的思想，做到有计划、有步骤地购进所需物资，对一切物资分类存放整齐，注意物资的积压，保证全院的物资供给所需，严格落实出入库、实物验收、清点、发放等制度，并做好物品建账，账物相符。保持室内外货物摆放有序，卫生整洁，并彻实做好防火、防盗、防破坏工作。

2、进一步加强和完善洗衣房的各项工作制度，严格对医院的被服衣物消毒等工作的管理，按时下收下送，保障供给，彻实做好全院的被服、衣物等的交账、清点、登记手续，严防错漏和丢失，严格遵守各种机电设备的操作规程，做到用电安全、生产安全，杜绝一切事故的发生，保持室内外环境卫生整洁。

第四季度：1、认真做好仪器质量管理工作，对相关设备日常应进行自检自测，并报相关单位，做好完整记录。

2、我院对除四害工作应常抓不懈，组织人员定期完成任务。四害即为灭鼠、蚊、蝇、蟑螂，投药区域要覆盖到位，不留死角。

3、 加强对医疗设备与生活设备的维修管理,虽然很多设备处在老龄化阶段,结合我院实际,能用设备应尽量发挥其主观能动性,平时做好养护工作,尽量降低维修率,要有为医院节约一张纸、一滴水的觉悟。

病理工作计划篇7

在新的一年里，随着医疗改革的深入发展，在上级和院领导的正确领导和指引下，病理科全体同志认真学习贯彻党的十七大精神、高举中国特色社会主义伟大旗帜、邓小平理论和?三个代表?的重要思想为指导，全面贯彻落实科学发展观，彻实加强行风建设，提高员工思想素质和服务质量，做好全院后勤的供给保障工作，时刻树立为临床一线服务需要，努力搞好院容院貌和两个文明建设，努力营造一个干净、整洁、环境舒适、绿化优美的就医环境，为提高我院的社会效益和经济效益而努力做好工作，特订以下的工作计划：

1、进一步抓好院容院貌和两个文明建设，强化院内外环境卫生的整洁，完善各项卫生工作制度和保洁措施调动广大员工的积极性和主动性，努力提高服务质量做到经常与突击相结合，实行岗位责任制，坚持进行卫生工作检查评比制度。继续努力把全院的卫生各项工作全面推向社会服务代管理，使我院的环境卫生工作落到实处，营造一个干净、整洁、、环境舒适、绿化优美的就医环境。

2、加强医院后勤仓库的管理工作，严格遵守各项规章制度，对全院部分固定资产低值消耗品及其他材料等物资的妥善保管的同时树立为临床一线医疗服务的思想，做到有计划、有步骤地购进所需物资，对一切物资分类存放整齐，注意物资的积压、变质、霉烂的处理，保证全院的物资供给所需，严格落实出入库、实物验收、清点、发放等制度，并做好物品分类建账，账物相符。保持室内外货物摆放有序，卫生整洁，并彻实做好防火、防盗、防破坏工作。

3、进一步加强和完善洗衣房的各项工作制度，严格对医院的被服衣物隔离消毒等工作的管理，按时下收下送，保障供给，彻实做好全院的被服、衣物等的交账、清点、登记手续，严防错漏和丢失，严格遵守各种机电设备的操作规程，做到用电安全、生产安全，杜绝一切事故的发生，保持室内外环境卫生整洁。

4、加强落实医院职工饭堂的管理制度，完善职工饭堂必须做到民主管理、虚心接受和听取职工意见和建议，努力提高烹调业务技术和服务质量，做到菜式品种多样化，饭热菜香，积极改善职工伙食，严格对各种票据及实物验收、餐票登记，定期清理结账等制度积极搞好饭堂的环境卫生及个人卫生，坚持从业人员每年进行身体健康检查，严格做好防蝇、防尘、防毒、防霉及各类餐具的消毒工作，保持室内外的环境卫生整洁。

5、加强医院安全保卫工作及消防安全管理工作

(1)医院的安全保卫工作：加强组织全体保安人员学习《治安管理条例》和医院有关安全保卫的规定，明确保安人员的任务和职责，积极维护本院内的治安秩序和一切车辆管理秩序，随时应付突发事件的发生，及时向院部或上级部门报告，控制事态的发展。坚守工作岗位，并做好着装整齐及交接班制度，保护好医院的电房、仓库、药等医院的重要设施，确保医院各项工作顺利进行。

建议：在经济允许的情况下将医院安全保卫工作推出社会，由社会服务业负责。

(2)医院的生产安全消防安全管理工作：彻实加强对全院的机电设施消防设施检查和落实，严格遵守各种机电设备、消防设施的操作规程，坚持做好检修保养。积极开展消防安全宣传短程教育，努力提高广大职工的安全意识和自我保护能力，以防为主，防范结合，消除不安全生产的隐患，杜绝事故发生。

5、医院基础设施建设及科室设置装修改选工程：积极配合医院按规划对科室的设置有计划、分步、合理地进行改造装修。妥善处理建筑材料的堆放，及时处理现场的建筑残留物，保持环境卫生整洁。并按有关规定做好工程预算、结算和质量验收等工作。

HE染色是应用最广泛的组织病理学常规染色技术。

一染色程序

1．石蜡切片HE染色（常规HE染色）

（1）二甲苯Ⅰ 5～10min

（2）二甲苯Ⅱ 5～10min

（3）无水乙醇Ⅰ 1～3min

（4）无水乙醇Ⅱ 1～3min

（5）95%乙醇Ⅰ 1～3min

（6）95%乙醇Ⅱ 1～3min

（7）80%乙醇 1min

（8）蒸馏水 1min

（9）苏木素液染色 5～10min

（10）流水洗去苏木素液 1min

（11）1%盐酸-乙醇 1～3s

（12）稍水洗 1～2s

（13）返蓝（用温水或1%氨水等） 5～10s

（14）流水冲洗 1～2min

（15）蒸馏水洗 1～2min

（16）0.5%伊红液染色 1～3min

（17）蒸馏水稍洗 1～2s

（18）80%乙醇 1～2s

（19）95%乙醇Ⅰ 2～3min

（20）95%乙醇Ⅱ 2～3min

（21）无水乙醇Ⅰ &, nbsp; 3～5min

（22）无水乙醇Ⅱ 3～5min

（23）石炭酸-二甲苯 3～5min

（24）二甲苯Ⅰ 3～5min

（25）二甲苯Ⅱ 3～5min

（26）二甲苯Ⅲ 3～5min

（27）中性树胶封固

注：①（12）和（13）项可省去，但（14）的冲水时间需延长至10～15min（细胞核显示更清晰）。

②（23）项可用无水乙醇代替；北方地区可省略。

2．冰冻切片HE染色

（1）冰冻切片固定 10～30s

（2）稍水洗 1～2s

（3）苏木素液染色（60℃） 30～60s

（4）流水洗去苏木素液 5～10s

（5）1%盐酸-乙醇 &n, bsp; &nbs, p; &nb, sp; 1～3s

（6）稍水洗 1～2min

（7）返蓝（用温水或1%氨水等） 5～10s

（8）流水冲洗 15～30s

（9）0.5%伊红液染色 1～2min

（10）蒸馏水稍洗 1～2min

（11）80%乙醇 1～2min

（12）95%乙醇 1～2min

（13）无水乙醇Ⅰ 1～2min

（14）无水乙醇Ⅱ 1～2min

（15）石炭酸-二甲苯 2～3min

（16）二甲苯Ⅰ 2～3min

（17）二甲苯Ⅱ 2～3min

（18）中性树胶封固

注：①（7）和（8）项可省去，但（9）的冲水时间需延长至10～15min（细胞核显示更清晰）。

②（15）项可用无水乙醇代替；北方地区可省略。

二染色结果：细胞核呈蓝色，细胞浆、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈不同程度的红色。钙盐和细菌可呈蓝色或紫蓝色。

三染色注意事项

1．切片染色前，应彻底脱蜡。

2．用含有升汞液体固定的组织，其切片染色前应先脱去汞盐：

（1）石蜡切片脱蜡至水洗

（2）Lugol液 20min

（3）流水冲洗 5min

（4）95%乙醇 10min

（5）水洗 1min

（6）5%次亚硫酸钠水溶液 5min

（7）流水冲洗 5min

（8）显微镜观察除汞满意后，转入HE染色

3．脱除福尔马林色素（必要时）：

（1）石蜡切片脱蜡至水洗

（2）1%NaOH(1ml)与80%乙醇（99ml）混合液 10min

（3）流水冲洗 5min

（4）转入HE染色

4．严格执行HE染色流程，用显微镜控制细胞核的苏木素染色质量。HE染片应着色鲜艳，红、蓝分明，对比清晰。

5．载玻片自二甲苯中取出后，应立即用洁净、光亮的盖玻片和稠度适宜的中性树胶湿封载玻片。封盖处内无气泡，外无溢胶。封片时必须进行操作人员和局部环境的二甲苯污染防护。不应将组织切片烤干或风干后再行封片。

6．必须在载玻片的一端牢贴标签。标签上应印有病理科所在的医院名称。标签上应清楚显示有关的病理号及其亚号；标签上的病理号应准确无误，无涂改。

7．制片完成后，技术人员应对切片与其相应的病理学检查记录单或取材工作记录单认真进行核对；确认无误后，将制备好的切片连同相关的活检申请单/活检记录单以及取材工作单等一并移交给有关的病理医师；交接双方经核对无误后，办理移交签字手续。

8．石蜡切片-HE染色的优良率（甲、乙级切片所占的比率）应≥85%。石蜡切片-HE染色质量的基本标准列于附表。

9．制片工作一般应在取材后2个工作日内完成（不含进行脱钙、脱脂等需要特殊处理的标本）。

10．制片过程出现意外情况时，技术室人员应及时向病理医师和科主任报告，设法予以补救。

附表 常规石蜡包埋-HE染色切片质量的基本标准

优 质 标 准 满 分 质 量 缺 陷 减 分

⒈组织切面完整， ①组织稍不完整：减1～3分　②不完整：减4～10分

内镜咬检、穿刺标本切面数 10 ③未达到规定面数：减5分

⒉切片薄(3～5μm)，厚薄均匀 10 ①切片厚(细胞重叠)，影响诊断：减6～10分

②厚薄不均匀：减3～5分

⒊切片无刀痕、裂隙、颤痕 10 ①有刀痕、裂隙、颤痕，尚不影响诊断：减2分

②有刀痕、裂隙、颤痕，影响诊断：减5分

⒋切片平坦，无皱褶、折叠 10 ①有皱褶或折叠，尚不影响诊断：各减2分

②有皱褶折或折叠，影响诊断：各减5分

⒌切片无污染 10 有污染：减10分

⒍无气泡（切片与载玻片间/ 10 ①有气泡：减3分

盖片与切片、载玻片间）， ②胶液外溢：减3分

盖片周围无胶液外溢

⒎透明度好 10 ①透明度差：减1～3分

②组织结构模糊：减5～7分

⒏细胞核与细胞浆染色对比清晰 10 ①细胞核着色灰淡或过蓝：减5分

②红(细胞浆)与蓝(细胞核)对比不清晰：减5分

⒐切片无松散，裱贴位置适当 10 ①切片松散：减5分

②切片裱贴位置不当：减5分

⒑切片整洁， ①切片不整洁：减3分

标签端正粘牢，编号清晰 10 ②标签粘贴不牢：减3分

③编号不清晰：减4分

合 计 100

切片质量分级标准： ①甲级片： ≥90分 （优）

②乙级片：75～89分（良）

③丙级片：60～74分（基本合格）

④丁级片： ≤59分 （不合格）

四HE染色试剂的配制

1．苏木素染液

（1）Harri苏木素染液

苏木素 1g

无水乙醇 10ml

硫酸铝钾 20g

蒸馏水 200ml

氧化汞 0.5g

冰醋酸 8ml

先用无水乙醇溶解苏木素，用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾；然后将该两液合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌溶液至深紫色，随即用冰水冷却，恢复至室温后过滤备用。使用前加入冰醋酸并混匀、过滤。

（2）Gill改良苏木素液

苏木素 2g

无水乙醇 250ml

硫酸铝钾 17g

蒸馏水 750ml

碘酸钠 0.2g

冰醋酸 20ml

先用无水乙醇溶解苏木素，用蒸馏水溶解硫酸铝钾；然后将该两液混合，再依次加入碘酸钠和冰醋酸。使用前过滤。

（3）Mayer改良苏木素液

A液：苏木素 2g

无水乙醇 40ml

B液：硫酸铝钾 100g

蒸馏水 600ml

将苏木素溶于无水乙醇中（A液）；稍加热，使硫酸铝钾溶于蒸馏水中（B液）。将A液与B液混合后煮沸2min，再用蒸馏水补足至600 ml，加入400mg碘化钠充分混匀。染液呈紫红色。

2. 盐酸－乙醇分化液

浓盐酸 1 ml

70%乙醇 99 ml

3．伊红液

（1）0.25～0.5%伊红Y水溶液

伊红Y 0.25～0.5 g

蒸馏水 100 ml

冰醋酸 1滴

（2）0.5%伊红Y-氯化钙水溶液

伊红Y 0.5 g

蒸馏水 100 ml

无水氯化钙 0.5 g

（3）0.25～0.5%伊红Y-乙醇溶液。

伊红Y 0.25~0.5 g

80%乙醇 100 ml

4．石炭酸-二甲苯混合液

石炭酸 1份

二甲苯 3份

石蜡组织切片的HE染色

1．取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，4μm切片。

2．切片常规用二甲苯脱蜡，经各级乙醇至水洗：二甲苯（I）5min→二甲苯（Ⅱ）5min→100％乙醇2min→95％的乙醇1min→80％乙醇1min→75％乙醇1min→蒸馏水洗2min。

3．苏木素染色5min，自来水冲洗。

4．盐酸乙醇分化30s（提插数下）。

5．自来水浸泡15min或温水（约50℃）5min。

6．置伊红液2min。

7．常规脱水，透明，封片：95％乙醇（I）min→95％乙醇（Ⅱ）1min→100％乙醇（I）1min→100％乙醇（Ⅱ）1min→二甲苯石碳酸（3：1）1min→二甲苯（I）1min→二甲苯（Ⅱ）1min→中性树脂封固。

免疫组化操作规程

（一）、仪器设备

1）18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉；

2）水浴锅

（二）、试剂

1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。

2）0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液（CB，pH6.0，1000ml）：柠檬酸三钠 3g，柠檬酸 0.4g。

3）0.5mol/L EDTA缓冲液（pH8.0）：700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O，用10 mmol/L NaOH调至pH8.0,加水至1000ml。

4）1mol/L的TBS缓冲液（pH8.0）：在800ml水中溶解121gTris碱，用1N的HCl调至pH8.0,加水至1000ml。

5）酶消化液： a、0.1%胰蛋白酶液：用0.1%CaCl2(pH7.8) 配制。 b、0.4%胃蛋白酶液：用0.1N的HCl配制。

6）3%甲醇-H2O2溶液：用30%H2O2和80%甲醇溶液配制。

7）封裱剂：

a、甘油和0.5mmol/L碳酸盐缓冲液（pH9.0～9.5）等量混合；

b、油和TBS(或PBS)配制。

8）TBS/PBS pH9.0～9.5，适用于荧光显微镜标本；pH7.0～7.4适合于光学显微镜标本。

（三）、操作流程

1、脱蜡和水化

脱蜡前，应将组织芯片在室温中放置60分钟或60℃恒温箱中烘烤20分钟。

1）组织芯片置于二甲苯中浸泡10分钟，更换二甲苯后再浸泡10分钟；

2）无水乙醇中浸泡5分钟；

3）95%乙醇中浸泡5分钟；

4）70%乙醇中浸泡5分钟；

2、抗原修复

用于福尔马林固定的石蜡包埋组织芯片。

1）抗原热修复

（1）高压热修复 在沸水中加入EDTA（pH8.0）或0.01M枸橼酸钠缓冲溶液（pH6.0）。盖上不锈钢高压锅的盖子，但不进行锁定。将玻片置于金属染色架上，缓慢加压，使玻片在缓冲液中浸泡5分钟，然后将盖子锁定，小阀门将会升起来。10分钟后，去除热源，置入凉水中，当小阀门沉下去后打开盖子。本方法适用于较难检测或核抗原的抗原修复。

（2）煮沸热修复 电炉或者水浴锅加热0.01M枸橼酸钠缓冲溶液（pH6.0）至95℃左右，放入组织芯片加热10~15分钟。

（3）微波热修复 在微波炉里加热0.01M枸橼酸钠缓冲溶液（pH6.0）至沸腾后将组织芯片放入，断电，间隔5~10分钟，反复1-2次。适用的抗原有：AR，Bax，Bcl-2，C-fos，X-jun，C-kit，C-myc，E-cadherin，Chromogranin A，Cyclin，ER，Heat shock protein，HPV，Ki-67，MDMZ，p53，p34，p16，p15，P-glycoprotein，PKC，PR，PCNA，ras，Rb，TopoismeraseⅡ等。

2）酶消化方法 常用0.1%胰蛋白酶和0.4%胃蛋白酶液。胰蛋白酶使用前预热至37℃，切片也预热至37℃，消化时间约为5~30分钟；胃蛋白酶消化37℃时间为30分钟。适用于被固定遮避的抗原，其中有：Collagen，Complement，Cytokeratin，C-erB-2，GFAP，LCA，LN等。

3、免疫组织化学染色

SP法

1）脱蜡、水化；

2）PBS洗2～3次各5分钟；

3）3%H2O2（80%甲醇）滴加在TMA上，室温静置10分钟；

4）PBS洗2～3次各5分钟；

5）抗原修复；

6）PBS洗2～3次各5分钟；

7）滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。

8）滴加Ⅰ抗50μl，室温静置1小时或者4℃过夜或者37℃1小时。

9）4℃过夜后需在37℃复温45分钟。

10）PBS洗3次各5分钟；

11）滴加Ⅱ抗40～50μl，室温静置，或37℃1小时；

12）II抗中可加入0.05%的tween-20。

13）PBS洗3次各5分钟；

14）DAB显色5～10分钟，在显微镜下掌握染色程度；

15）PBS或自来水冲洗10分钟；

16）苏木精复染2分钟，盐酸酒精分化；

17）自来水冲洗10～15分钟；

18）脱水、透明、封片、镜检。

SABC法

1)脱蜡、水化。

2)PBS洗两次各5分钟。

3)用蒸馏水或PBS配置新鲜的3%H2O2，室温封闭5～10分钟，蒸馏水洗3次。

4)抗原修复。

5)PBS洗5分钟。

6)滴加正常山羊血清封闭液，室温20分钟。甩去多余液体。

7)滴加Ⅰ抗,室温1小时或者4℃过夜或者37℃1小时（4℃过夜后在37℃复温45分钟）。

8)PBS洗三次每次2分钟。

9)滴加生物素化二抗,20℃～37℃20分钟。

10)PBC洗3次每次2分钟。

11)滴加试剂SABC，20℃～37℃20分钟。

12)PBS洗4次每次5分钟。

13)DAB显色：DAB显色试剂盒或者自配显色剂显色（镜下掌握显色程度）。

14)蒸馏水洗。苏木素复染2分钟、盐酸酒精分化。

15)脱水、透明、封片、镜检。

PAS染色法

操作步骤

1. 固定液:用Carnoy液或75%酒精　 Carnoy固定液: 纯酒精 60 ml　 冰醋酸 10ml 氯仿 30ml

2. 染色液

1) 过碘酸酒清夜配法:

过碘酸(HIO .2H O) 0.4g　 95% 酒精 35ml　 M/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml) 5ml蒸馏水10ml

保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周.

2) Schiff氏液:

0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解.冷却至50℃后过滤,加入10毫升1N盐酸.冷却至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存.

3) Schiff氏酒精液配置Schiff氏液 11.5ml　 1N HCI 0.5ml　 纯酒精 23ml

4) 亚硫酸水

1%偏重亚硫酸钠 10ml 1N HCI 10ml 蒸馏水 180ml的树胶溶解。

Schiff（希弗）试剂

在100 mL热水里溶解0.2 g品红盐酸盐（也有叫碱性品红或盐基品红），放置冷却后，加入2g亚硫酸氢钠和2 mL浓盐酸，再用蒸馏水稀释到200 mL。

或先配制10 mL二氧化硫的饱和水溶液，冷却后加人0．2g品红盐酸盐，溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡**，用蒸馏水稀释至200 mL。

此外，也可以将0.5 g品红的盐酸盐溶于100 mL热水中，冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失，加人0.5 g活性炭，振荡过滤，再用蒸馏水稀释至500 mL。本试剂所用的品红是para-rossaniline（或称para-fuchsin,又称假红）。此物与另一类似物rossaniline（或称fuchsin,称洋红）不同。

品红溶液原是桃红色，被二氧化硫饱和后变成无色的Schiff试剂。

Schiff试剂应密封贮存于暗冷处，倘若受热见光或露置空气中过久，试剂中的二氧化硫易失，结果又显桃红色，遇此情况，应再通入二氧化硫，使颜色消失后使用。但应指出，试剂中过量的二氧化硫愈少，反应就愈灵敏。