详述氨基甲酸酯类农药残留前处理方法
NY-8DL的农药残留速测仪前处理的流程是这样的:
1.试剂配制
A 提取液:将提取液粉剂倒入500mL烧杯内,加510mL蒸馏水,可在常温下保存。
B 酶液:每瓶酶液加3.1mL提取液,摇匀后即可使用,配制好的酶液在0~4℃保存,可使用7天。
C 底物:每瓶底物中加入3.1mL蒸馏水,摇匀后即可使用,配制好的酶液在0~4℃保存,可使用7天。
D 显色剂:在小瓶内加入32ml提取液,摇匀使用,避光冷藏保存。
注:酶和底物未配制时,必须放置在冰箱0℃以下冷冻室保存(有效期为壹年)。
购买回的新试剂要注意包装袋上的配制说明,配制量可能不完全等同该项说明。
2.样品提取
取2g有代表性的果蔬样品,冲洗掉表面泥土,剪成25px左右见方碎片,放入样品处理杯中,加入10mL提取液振荡10-5min(有条件的用超声波振荡),静置2min取上清液,上清液不清时需用滤纸过滤,滤液为样品处理液备用。
3.试剂对照溶液制作
取1支10mL比色管,加入提取液2.5mL,再分别加入100uL酶液及100uL显示剂,混匀后放置15分钟(如果温度低于25℃,需在37℃恒温水浴中放置15分钟),时间到后,马上加入100uL底物混匀并立即倒入25px比色皿中放入仪器检测。注:吸光度应在0.3以上,小于0.3可能试剂已失效。
在使用过程中,更换新一瓶试剂环境温度发生明显变化或同一瓶试剂上次对照做的时间超过4小时以上应再做一次对照。
4.检测溶液制作
取1支10mL比色管,加入待测样品2.5mL,再分别加入100uL酶液及100uL显示剂,混匀后放置15分钟(如果温度低于25℃,需在37℃恒温水浴中放置15分钟)时间到后,马上加入100uL底物混匀并立即倒入25px比色皿中放入仪器检测。
5.测试结果的判读
若被测样品的酶抑制率读数超过50%(即达到50%以上)时,则表明蔬果中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在,样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验2次以上。还需用气相色谱法等分析方法做进一步的确认。如果仪器放了比色皿后结果显示---,则是要加试剂或是样品农药浓度过高,需稀释后再测。
葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。处理这类样品时,可采取整株蔬果浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜也可采取整株浸提的方法,以减少色素的干扰。
注:本操作中所用溶液可使用移液器吸取;
比色皿应将光滑面对准光放入比色槽,比色槽顺序从离自己最近的那个开始;
配置好的溶液必须马上测定,否则将影响测量结果。
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