菌种保藏的常用方法及特点
（1）斜面低温保藏。是一种最常用、最简便的菌种保藏方法。首先将需要保藏的菌种接到斜面培养基上，在适宜的温度条下培养，当菌丝健壮地长满斜面时，即将此试管菌种取出，放置于4 ℃的冰箱中保藏。特点：
①简单易行，适用于各类菇类菌种保藏，是目前生产及科研普遍采用的一种方法；②保藏时间短，需6个月转接一次，转管次数多菌丝变异的可能性大；③如改用橡皮塞并用石蜡扣，可保藏1年～3年。
（2）液体石蜡保藏。液体石蜡保藏也称为矿油保藏，即用矿油覆盖试管斜面试管保藏的方法。矿油是指无色、透明、黏稠、性质稳定、不易被微生物分解的石蜡油和液体石蜡，将其覆盖在斜面菌种之上，可以隔绝空气，防治培养基水分蒸发，抑制微生物的代谢活动，推迟细胞老化，从而达到长期保藏菌种的目的。特点：
①方法简便易行，保藏条件不严格，保藏时间长，可作为长期保藏菌种的方法；②菌种必须垂直放，放置不方便。
（3）滤纸保藏。滤纸保藏是一种以无菌滤纸作为食用菌孢子吸附载体长期保藏菌种的方法，又称滤纸孢子保藏法。特点：技术要求高，设备费用大，菌种不易衰老退化，菌种保藏时间长很少变异。
（4）自然基质保藏。自然基质保藏就是以不含毒性、刺激性和抑菌性而富含营养的自然生长的基质作培养基来保藏菌种的方法。自然基质很多，食用菌常用的自然基质有发酵的粪草、木屑及枝条基质等，取材方便，制作方法简便，保藏时间也较长。使用时，只需取一块、一粒或一条培养物放在新鲜的培养基上，并在适温下培养即可。特点：方法简便易行，保藏时间长。
如何防止黑木耳菌种退化？
液氮保藏菌种原理
菌种保藏就是对活体微生物群体进行有效的保存，使菌体不si、不衰、不变，以便于研究和应用。菌种保藏方法有很多种，保藏的原理是运用干燥、低温和隔绝空气的手段，降低微生物菌株的新陈代谢速度，使菌体生命活动处于半永久性休眠状态，从而达到保藏目的。
液氮超低温保藏法原理是将细胞冷冻，使其代谢活动停止，从而使细胞处于休眠状态中长期保存。一般来说，保藏温度越低，效果越好。在液氮中，温度可达到-196℃，因此从适用的微生物范围、存活期限及状态稳定性等方面来看，液氮超低温保藏法是较理想的一种保藏方法。
在-196℃下保藏菌种，其存活率受降温过程冷冻速度的影响特别显著。一般菌种悬液中要加入防冻剂，常用的冷冻保护剂是二甲亚砜和甘油，缓慢冷冻效果较好。
此法保藏菌种一般达二十年以上，除适宜于一般微生物的保藏外，对一些用冷冻干燥法都难以保存的微生物，如支原体、衣原体、氢细菌、难以形成孢子的霉菌、噬菌体及动物细胞也可长期保藏，而且性状不变异。对那些在培养基上只产生菌丝体的真菌，其中尤以担子菌内的菌株，须采用此法保藏，才可获得满意的效果。此法操作技术并不复杂，只要有液氮罐或液氮冰箱设备，便可操作。
黑木耳菌种的遗传稳定性是相对的，遗传的变异性是绝对的。菌种发生某些性状向坏的方向变异，称为菌种“退化”。菌种“退化”有遗传造成的原因，有环境造成的原因。常见的黑木耳菌种“退化”现象如菌盖变小，菌肉变薄，菌柄变长，出菇期推迟，出菇潮数少，抗逆性差等。但黑木耳菌种“退化”的机理总体尚不清楚。
根据黑木耳菌种保藏的经验教训，本人认为防止“退化”并无妙手回春的好办法，只有在菌种保藏和使用过程中多加小心。
（1）保藏黑木耳菌种的条件要稳定，干净。菌种保藏的专用设备不可将保藏条件悬殊过大的种类一起保藏，如黑木耳与草菇、茯苓等不可在同一条件的容器内保存；容器内必须干净，温度必须稳定，不随便开启，尽量少打开保藏菌种容器。
（2）变更培养基保藏，如PDA与木屑培养基同时使用，繁殖时同时比较，选择使用。
（3）每年进行一次实验室常规性状测试比较，变异较大的菌株停止使用，更换培养基后可恢复性状的可继续使用。
（4）有条件的应成批放入液氮罐保存，每年取出一支或数支试管进行繁殖，恢复繁殖时按常规进行必要性能测试。
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